一、DNA提取
样本采集与处理
根据样本类型（如血液、唾液、植物组织、考古遗骸等）选择合适采集方法。例如，血液需离心分离白细胞，植物需液氮研磨，而考古样本需用次氯酸溶液浸泡去除污染。样本保存需避光、低温，防止DNA降解。
细胞裂解
通过物理或化学方法破坏细胞膜和核膜，释放DNA。物理方法包括研磨（植物）、超声破碎；化学方法常用SDS（十二烷基硫酸钠）溶解膜结构，蛋白酶K降解蛋白质。高温（如56℃加热）可加速裂解。
去除杂质与纯化
去蛋白：使用酚/氯仿抽提法分离DNA与蛋白质，或通过高盐溶解DNA、低盐沉淀蛋白质。
纯化：硅胶膜吸附法（如硅离心柱）选择性结合DNA，洗涤后洗脱纯净DNA；乙醇或异丙醇沉淀法通过离心收集DNA沉淀。需避免酸酶污染，确保DNA完整性。
二、DNA鉴定
定量分析
紫外分光光度法：检测260nm吸光度（A260）计算DNA浓度，A260/A280比值评估纯度（理想值为1.8-2.0）。
实时荧光定量PCR（qPCR）：精准测定DNA拷贝数，适用于微量样本。PCR扩增
针对特定区域（如STR位点、基因座）设计引物，通过温度循环（变性-退火-延伸）扩增目标DNA片段。扩增产物需满足后续分析需求。
分型与测序
电泳分析：琼脂糖凝胶电泳观察DNA片段大小，EB染色或SYBR Green显色。
STR分析：短串联重复序列分型通过毛细管电泳检测片段长度多态性，用于法医学和亲子鉴定。
高通量测序：全面解析DNA序列，适用于科研和复杂鉴定。
数据比对与报告
将分型结果与数据库或参考样本比对，计算亲缘关系指数（如亲子鉴定中的CPI值）。最终报告需经质量控制，确保法律效力。
三、注意事项
污染控制：操作环境需无菌，避免气溶胶污染；设置阴性对照（如“提取空白”）监测交叉污染。
伦理与合规：涉及隐私的鉴定需遵循法律法规，确保数据安全。
技术选择：不同样本（如高盐碱土壤、降解遗骸）需适配提取方法，如加入石英砂增强裂解。
四、应用领域
从刑事侦查的物证鉴定到古人类遗骸的谱系研究，再到农业育种中的基因筛选，DNA技术的精准性使其成为多学科交叉的核心工具。
综上，DNA提取与鉴定通过标准化的步骤和多样化技术，为科学研究和实际应用提供了可靠的数据基础，其操作严谨性直接决定了结果的权威性。
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