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dna鉴定的技术方法包括什么

时间:2025-04-13 14:52:39 作者:小编 点击:

一、DNA提取技术

物理提取法

细胞破碎:植物样本需研磨(如菜花),动物细胞(如鸡血)通过离心分离。

沉淀收集:玻璃棒缠绕絮状DNA或离心获取沉淀物。

化学纯化法

去除杂质:利用高盐溶解DNA、低盐沉淀蛋白质,或通过冷酒精纯化。

酚氯仿法/磁珠法:通过抽提去除蛋白质、多糖等杂质,获得高纯度DNA。

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二、DNA扩增技术常规PCR(聚合酶链式反应)

由Kary Mullis于1983年发明,通过引物和DNA聚合酶扩增特定片段,用于微量样本分析。

实时定量PCR(qPCR)

结合荧光探针实时监测扩增过程,用于DNA定量和病原体检测。

特殊扩增技术

STR-PCR:针对短串联重复序列(STR)扩增,用于法医学个体识别。

数字PCR:通过微滴分区实现绝对定量,适用于低浓度样本。

三、DNA分离与定量分析

电泳技术

琼脂糖凝胶电泳:按DNA片段大小分离,形成特定条带图谱。

毛细管电泳:高分辨率分离STR或测序产物,常用于法医鉴定。

光谱与显色法

紫外吸收法:通过260 nm吸光度定量DNA浓度。

二苯胺法:DNA与试剂显蓝色,用于定性检测。

四、DNA序列分析技术

Sanger测序

传统测序方法,通过链终止反应测定碱基序列。

高通量测序

Illumina测序:基于桥式PCR和荧光检测,适用于大规模基因组分析。

纳米孔测序:通过电信号识别碱基,支持长读长和实时分析

五、特殊鉴定方法

STR分析

分析短串联重复序列的多态性,是法医个体识别的核心方法。

SNP分析

检测单核苷酸多态性(SNP),用于遗传病筛查和群体研究。

线粒体DNA分析

针对母系遗传的线粒体DNA,适用于降解样本或亲缘关系鉴定。

DNA指纹技术

通过限制性内切酶切割和探针杂交,生成个体特异性图谱。

六、辅助技术与质量控制

样本采集与处理

血液、唾液、毛发等样本需无菌操作,避免污染。

污染防控

实验环境需严格清洁,设置阴性/阳性对照排除干扰

定量与验证

通过实时qPCR或分光光度法评估DNA质量和浓度。

应用场景

法医学:犯罪现场生物痕迹鉴定(如精斑、血液)。

亲子鉴定:通过STR或SNP比对确认亲缘关系。

物种鉴定:利用PCR-RFLP或测序法鉴别野生动物制品。

医学诊断:遗传病筛查(如唐氏综合征)和个性化医疗。

未来展望

随着技术进步,DNA鉴定正朝着更高灵敏度(如单细胞测序)、快速便携(如手持式测序仪)和多功能整合(如多组学分析)的方向发展,将在司法、医疗和生态保护中发挥更大作用。

通过上述技术组合,DNA鉴定不仅能精准识别个体身份,还能揭示遗传信息,成为现代科学不可或缺的工具。


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