怎么提取DNA？如何保存提取到的DNA？

以下是一种常见的从生物样本中提取DNA的方法：

一、DNA提取方法

1.样本准备：

选择合适的生物样本，如血液、口腔拭子、组织等。如果是血液样本，可使用抗凝管收集，防止血液凝固。口腔拭子则需用专用的采样棉签在口腔内擦拭，获取口腔黏膜细胞。组织样本需要在无菌条件下采集，并尽快进行处理。

2.细胞裂解：

将样本加入到含有裂解液的试管中。裂解液通常含有去污剂（如SDS）和蛋白酶K，它们的作用是破坏细胞膜和核膜，使细胞内的物质释放出来，并降解蛋白质，从而使DNA游离出来。将试管置于适当的温度下（如55℃65℃）孵育一段时间，以确保细胞充分裂解。

3.去除蛋白质和其他杂质：

向裂解后的样本中加入盐溶液（如氯化钠），使蛋白质沉淀。然后通过离心等方法将沉淀的蛋白质与含有DNA的上清液分离。

有时还可以加入酚/氯仿等有机溶剂进行抽提，进一步去除蛋白质和其他杂质。酚/氯仿能够使蛋白质变性并沉淀，而DNA则留在水相上层。

4.DNA沉淀：

向含有DNA的上清液中加入冰冷的乙醇或异丙醇，使DNA沉淀出来。乙醇或异丙醇的作用是降低DNA在溶液中的溶解度，使其形成白色絮状沉淀。

可以将试管轻轻颠倒或用玻璃棒搅拌，促进DNA沉淀。然后通过离心等方法收集沉淀的DNA。

5.洗涤和溶解DNA：

将沉淀的DNA用70%乙醇洗涤，去除残留的盐和其他杂质。70%乙醇可以去除残留的盐离子，同时不会使DNA溶解。洗涤后，再次离心收集DNA。

最后，将DNA沉淀溶解在适量的缓冲液中，如TE缓冲液（Tris EDTA缓冲液），以便于保存和后续的分析。

二、保存提取到的DNA的方法

1.低温保存：

最常用的方法是将提取的DNA保存在20℃或80℃的低温冰箱中。在低温条件下，DNA分子的活性降低，降解速度减慢。可以将DNA溶液分装在小的离心管中，避免反复冻融，每次使用时取出一管，用完后尽快放回冰箱。

如果需要长期保存，可以考虑将DNA保存在液氮中，液氮的温度极低（196℃），可以更好地保护DNA的完整性。

2.加入保护剂：

在DNA溶液中加入适量的保护剂可以提高DNA的稳定性。例如，可以加入EDTA（乙二胺四乙酸），它能够螯合金属离子，抑制DNA酶的活性，防止DNA被降解。还可以加入一些抗氧化剂，如二硫苏糖醇（DTT）等，防止DNA被氧化。

3.避免污染：

在保存DNA时，要注意避免污染。使用无菌的离心管和移液器等工具，操作过程中要保持清洁。避免DNA溶液接触到可能含有DNA酶或其他污染物的物质。

可以将DNA溶液保存在密封的容器中，防止空气中的微生物和灰尘进入。

4.干燥保存：

对于一些特殊情况，可以将DNA干燥保存。例如，可以将DNA沉淀在空气中晾干或用真空干燥器干燥，然后将干燥的DNA粉末保存在密封的容器中，放在干燥、阴凉的地方。在需要使用时，再将DNA溶解在适当的缓冲液中。但这种方法可能会对DNA的质量产生一定的影响，需要谨慎使用。